腫瘤壞死因子α (Tumor necrosis factor-α，TNF-α)，是一種多功能的細(xì)胞因子，主要由活化的巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞產(chǎn)生并分泌，能夠直接殺傷腫瘤細(xì)胞而對正常細(xì)胞無明顯毒性。TNF-α還具有多種免疫調(diào)節(jié)作用，作為一種內(nèi)源性熱原，能夠誘導(dǎo)發(fā)燒，細(xì)胞死亡，惡病質(zhì)，炎癥并抑制腫瘤發(fā)生和病毒復(fù)制，并通過細(xì)胞產(chǎn)生IL-1和IL-6對敗血癥做出反應(yīng)。TNF-α的表達(dá)失調(diào)與多種疾病有關(guān)，如感染、自身免疫性疾病、癌癥、動脈粥樣硬化、阿爾茨海默病、炎癥性腸病和椎間盤退變等。

本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法定量測定人血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中的TNF-α含量。本試劑盒采用高親和力的抗人TNF-α抗體預(yù)包被酶標(biāo)板，將標(biāo)準(zhǔn)品/待測樣本加入微板孔中，經(jīng)過孵育后樣本中存在的TNF-α?xí)c酶標(biāo)板上的預(yù)包被抗體特異性結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合物后，將生物素標(biāo)記的抗人TNF-α檢測抗體加入微板孔中，再次孵育后檢測抗體會與錨定在酶標(biāo)板上的TNF-α特異性結(jié)合。隨后，將辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)加至微孔板中并孵育，通過檢測抗體上的生物素和鏈霉親和素發(fā)生的高強度非共價結(jié)合，形成“包被抗體-人TNF-α蛋白-檢測抗體-Streptavidin-HRP”免疫復(fù)合物。再次洗滌后，將顯色底物TMB加至微板孔中，HRP會催化TMB底物生成藍(lán)色產(chǎn)物，顏色反應(yīng)的深淺將與樣本中TNF-α的濃度成正相關(guān)。而后加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm波長(參考波長570 - 630 nm)處測定吸光度值。通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，由樣本吸光度值可計算出樣本中所含TNF-α濃度。本試劑盒特異性強、檢測靈敏度高，同時操作更加便捷。