人粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子，也稱GM-CSF、CSF-2，是由多種活化的免疫細(xì)胞、間充質(zhì)細(xì)胞和上皮細(xì)胞等分泌的一種單體糖蛋白。成熟的人GM-CSF與小鼠和大鼠GM-CSF的氨基酸序列同源性分別為54%和63%。GM-CSF具有多種生物學(xué)功能，如能刺激CD34+干細(xì)胞前體分化為單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞；可以做為中性粒細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞的一種趨化因子。GM-CSF還參與Th1、Th17 細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫反應(yīng)，與樹突狀細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞、肺泡巨噬細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞等的炎癥激活有關(guān)。此外，GM-CSF通過免疫依賴和非依賴的途徑調(diào)控腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移。

本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法定量測(cè)定人血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中的GM-CSF含量。本試劑盒采用高親和力的抗人GM-CSF抗體預(yù)包被酶標(biāo)板，將標(biāo)準(zhǔn)品/待測(cè)樣本和生物素標(biāo)記的抗人GM-CSF檢測(cè)抗體同步加入微板孔中，經(jīng)過孵育后樣本中存在的GM-CSF會(huì)與酶標(biāo)板上的預(yù)包被抗體及檢測(cè)抗體特異性結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合物后，將辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)加至微孔板中并孵育，通過檢測(cè)抗體上的生物素和鏈霉親和素發(fā)生的高強(qiáng)度非共價(jià)結(jié)合，形成“包被抗體-人GM-CSF蛋白-檢測(cè)抗體-Streptavidin-HRP”免疫復(fù)合物。再次洗滌后，將顯色底物TMB加至微板孔中，HRP會(huì)催化TMB底物生成藍(lán)色產(chǎn)物，顏色反應(yīng)的深淺將與樣本中GM-CSF的濃度成正相關(guān)。而后加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570 - 630 nm)處測(cè)定吸光度值。通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，由樣本吸光度值可計(jì)算出樣本中所含GM-CSF濃度。本試劑盒特異性強(qiáng)、檢測(cè)靈敏度高，同時(shí)操作更加便捷。